Экспериментальное обоснование эндотелиопротективного эффекта иммуноглобулинов для внутривенного введения при акушерской патологии

Чепанов С.В., Соколов Д.И., Шляхтенко Т.Н., Капустин Р.В., Окорокова Л.С., Белякова К.Л., Сельков С.А.

ФГНУ Научно-исследовательский институт акушерства, гинекологии и репродуктологии им Д.О. Отта, Санкт-Петербург, Россия
Цель исследования. Оценка цитопротективного эффекта иммуноглобулинов для внутривенного введения (ВВИГ) в отношении эндотелиальных клеток.
Материал и методы. Проведено исследование цитотоксических эффектов сывороток 45 беременных женщин в отношении эндотелиальных клеток, обработанных препаратом иммуноглобулинов для внутривенного введения, с помощью культурального, иммуноферментного метода и метода проточной цитометрии.
Результаты. После обработки эндотелиальных клеток ВВИГ выявлено снижение цитотоксического эффекта сыворотки крови женщин с привычным невынашиванием беременности в отношении эндотелиальных клеток.
Заключение. ВВИГ являются эффективными цитопротекторами, которые способны предотвратить развитие патологических состояний, связанных с повреждением эндотелия и развитием эндотелиальной дисфункции.

Ключевые слова

иммуноглобулины для внутривенного введения
эндотелиальные клетки
антифосфолипидный синдром
невынашивание беременности

Аутоиммунные синдромы занимают важное место в развитии различных форм акушерской патологии. Среди аутоиммунных нарушений, приводящих к потере беременности, ведущее место занимает антифосфолипидный синдром (АФС) [1, 2]. Патогенез практически всех клинических проявлений антифосфолипидного синдрома реализуется в результате нарушений микроциркуляции, гемостаза и патологии сосудистой стенки [3]. При этом одним из самых уязвимых мест являются эндотелиальные клетки [4]. Занимая уникальное положение на границе между циркулирующей кровью и тканями, эндотелиальные клетки подвергаются воздействию различных факторов, находящихся в системном и тканевом кровотоке [5]. При действии на сосудистый эндотелий антифосфолипидных антител, компонентов комплемента, гипоксии, повышенного артериального давления, наблюдаемых в патогенезе АФС, преэклампсии, атеросклероза, происходит гиперэкспрессия клеточных молекул адгезии [6], увеличивается высвобождение вазоконстрикторных субстанций, повышающих сосудистый тонус, агрегацию тромбоцитов и свертывание крови, таких как эндотелин-1, тромбоксан и др. [7]. Параллельно развивается системная эндотелиальная дисфункция, которая характеризуется дисбалансом между различными эндотелиальными медиаторами (вазодилататоры – вазоконстрикторы, анти- и прокоагуянты) [8], происходит нарушение функции эндотелия, приводящее к усиленной адгезии и агрегации тромбоцитов, внутрисосудистому тромбозу в маточно-плацентарном комплексе, что является интегральным этиопатогенетическим фактором большинства акушерских патологий [9].

Оптимальным для профилактики повторных потерь плода, а также венозных и артериальных тромбозов считается сочетанное применение низких доз ацетилсалициловой кислоты и низкомолекулярных гепаринов [10]. Но даже при проведении такой терапии, неблагоприятные исходы беременности у женщин с АФС до сих пор варьируют в пределах 20–30% случаев [11]. Наиболее эффективным методом терапии АФС при беременности является использование иммуноглобулинов для внутривенного введения (ВВИГ) [12, 13], поскольку использование других препаратов, в частности, подавляющих синтез аутоантител ограничено. Следует отметить, что ВВИГ могут быть использованы и при других заболеваниях, связанных с повреждением эндотелия и формированием эндотелиальной дисфункции [14].

АФС на сегодняшний день не включен в список показаний к применению ВВИГ, их использование при данной нозологии находится за пределами инструкций («off-label») [15], так как имеющиеся данные пока еще не дают однозначного ответа на вопрос об использовании этих препаратов при данном виде патологии [16, 17]. Требуются дополнительные исследования, обосновывающие их использование в акушерской и терапевтической практике.

Целью настоящего исследования явилась оценка цитопротективного эффекта ВВИГ в отношении эндотелиальных клеток линии EA.Hy926.

Материал и методы исследования

Проведена оценка цитотоксических эффектов сывороток 45 беременных женщин на сроке до 12 недель, которых разделили на группы: беременные женщины с диагнозом привычное невынашивание и выявленными антифосфолипидными антителами; беременные женщины с диагнозом привычное невынашивание без повышенного уровня антифосфолипидных антител; женщины с физиологической беременностью.

Критериями включения в исследование были: репродуктивный возраст женщин с антифосфолипидными антителами; наличие в анамнезе невынашивания беременности; I триместр беременности. Критериями исключения были: почечная, печеночная недостаточность; пороки развития и доброкачественные новообразования матки; наличие эндокринных, генетических или инфекционных факторов невынашивания.

У пациенток забирали кровь из локтевой вены. Кровь центрифугировали, сыворотки отбирали в стерильных условиях и замораживали при температуре -20ºС.

В сыворотках периферической крови определяли уровень антифосфолипидных антител (к кардиолипину, фосфатидилсерину, фосфатидилинозитолу, фосфатидиловой кислоте), антител к β2-гликопротеину-I, антител к аннексину V, к протромбину методом твердофазного иммуноферментного анализа с использованием коммерческих тест-систем фирмы Orgentec Diagnostika GmbH (Германия).

Объектом исследования явились эндотелиальные клетки линии EA.Hy926, полученные путем гибридизации первичной эндотелиальной линии HUVEC с клетками карциномы легкого A-549. Клетки линии EA.Нy926 воспроизводят все основные морфологические, фенотипические и функциональные характеристики, присущие эндотелию. Клетки культивировали в полной среде DMEM/F12 (Sigma, США) с добавлением 10% инактивированной эмбриональной телячьей сыворотки (ЭТС) (Sigma, США), 10 мг/мл стрептомицина (Sigma, США), 1х105 ЕД/мл пенициллина (Sigma, США), 2 мМ L-глютамина (Sigma, США) и раствора гипоксантина–аминоптерин–тимидина (HAT) (Sigma, США), при 37˚С во влажной атмосфере с 5% содержанием СО2.

Для оценки токсичности ВВИГ «Интратект» (Biotest, Германия) в отношении эндотелиальных клеток, клетки линии EA.Hy926 культивировали в лунках 96-луночного плоскодонного планшета в концентрации 35000 клеток на лунку с ВВИГ в разведениях от 1:1 до 1:65536 при 37˚С во влажной атмосфере с 5% содержанием СО2 в течение 24 часов. Затем лунки отмывали раствором Хенкса с последующей окраской 0,2% кристаллическим фиолетовым (Sigma, США), содержащим 5% метанола. После окраски четырежды отмывали лунки дистиллированной водой, высушивали. Затем проводили экстракцию красителя 10% раствором уксусной кислоты. Учет оптической плотности проводили на микропланшетном фотометре (Biotek, США) при длине волны 540 нм. Снижение оптической плотности полученных растворов в лунках в присутствии разведений препарата по сравнению с оптической плотностью растворов в лунках, где клетки инкубировали в обычной среде, считали цитотоксическим эффектом препарата в отношении эндотелия. Минимальной токсической дозой ВВИГ явилась 6,250 мг/мл. Поэтому дальнейшие эксперименты проводили, используя препарат ВВИГ в концентрации 3,125 мг/мл.

Для оценки экспрессии Fc-рецепторов эндотелиальные клетки линии EA.Hy926 обрабатывали моноклональными антителами к CD16, CD32, CD64, (BD, США) в соответствии с рекомендациями производителя. Оценку экспрессии Fc-рецепторов проводили с использованием проточного цитофлуориметра FacsCanto II (BD, США).

Для оценки связывания с эндотелиальными клетками иммуноглобулинов класса G, входящих в состав препарата ВВИГ, клетки линии EA.Hy926 культивировали в присутствии ВВИГ в 24-луночном планшете. Затем клетки снимали с планшета раствором версена и обрабатывали антителами к иммуноглобулинам человека (Anti-Human IgG (H+L)FITC) в соответствии с рекомендациями производителя. Оценку связывания иммуноглобулинов с эндотелиальными клетками проводили с использованием проточного цитофлуориметра FacsCanto II (BD, США).

Для оценки влияния ВВИГ на изменение чувствительности эндотелиальных клеток к цитотоксическому эффекту сыворотки крови беременных женщин, клетки линии EA.hy926 культивировали в лунках 24-луночного плоскодонного планшета в концентрации 180000 клеток на лунку в 1 мл полной среды с добавлением ВВИГ. Клетки культивировали при 37˚С во влажной атмосфере с 5% содержанием СО2 в течение 6 часов. Затем клетки отмывали 1 мл питательной средой DMEM/F12 и на них наслаивали сыворотки крови. Для исключения влияния комплемента на цитотоксический эффект, использовали инактивированные при 56°С в течение 40 минут сыворотки крови. Затем клетки инкубировали 22 часа при 37˚С во влажной атмосфере с 5% содержанием СО2, снимали раствором версена, и окрашивали Propidium iodide в концентрации 3,6 нг/мл. В качестве контроля использовали клетки линии EA.Hy926 обработанные только сыворотками крови тех же пациентов, а также интактные клетки линии EA.Hy926. Оценку жизнеспособности эндотелиальных клеток проводили с использованием проточного цитофлуориметра FacsCanto II (BD, США).

Статистическую обработку полученных данных проводили при помощи программы Statistica for Windows 7.0, используя методы параметрической (критерий Стьюдента) и непараметрической (критерий Манна–Уитни) статистики.

Результаты исследования

В группе женщин с привычным невынашиванием и выявленными антифосфолипидными антителами (n=15) частота выявления аутоантител к кардиолипину составила 73,3%, антител к β2-гликопротеину-I – 73,3%, антител к эндотелиальным клеткам – 40%, антител к аннексину – 5–20%, антител к протромбину – 0%. Сочетанное выявление антител к кардиолипину и β2-гликопротеину-I отмечали у 53,3% женщин. Представленные данные показывают, что с наибольшей частотой при привычном невынашивании беременности выявляются антитела к кардиолипину и к β2-гликопротеину-I, что соответствует литературным данным [18, 19].

Нами установлено, что более 80% эндотелиальных клеток связывают на своей поверхности иммуноглобулины, входящие в препараты ВВИГ. Для оценки специфичности связывания иммуноглобулинов с эндотелиальными клетками мы опирались на данные источников литературы о том, что при физиологических условиях на поверхности эндотелия Fc-рецепторов нет, но под воздействием медиаторов воспаления, циркулирующих иммунных комплексов, токсинов, гемодинамической перегрузки, индуцируется экспрессия Fc-рецепторов эндотелиальными клетками [20, 21]. Нами также была проведена оценка экспрессии Fc-рецепторов эндотелиальными клетками линии EA.Hy926 без стимуляции и после стимуляции через 24 и 72 часа следующими активаторами в различных концентрациях: TNF-α (50Ед/мл, 100Ед/мл, 400Ед/мл.), INF-γ (100Ед/мл, 500Ед/мл, 1000Ед/мл.), INF-γ / TNF-α (15/100Ед/мл, 500/250Ед/мл, 1000/250 Ед/мл.) LPS (0,1Ед/мл; 1Ед/мл; 10Ед/мл; 100Ед/мл), а также сыворотками, содержащими повышенный уровень антифосфолипидных антител. При этом экспрессии Fc-рецепторов (CD16, CD32, CD64) на эндотелиальных клетках линии EA.Hy926 мы не наблюдали.

В результате проведенного исследования установлено, что нативные сыворотки крови женщин с физиологической беременностью оказывают меньшее токсическое действие на эндотелиальные клетки по сравнению с сыворотками крови беременных женщин с диагнозом привычное невынашивание с антифосфолипидными антителами и с сыворотками крови беременных женщин с диагнозом привычное невынашивание без антифосфолипидных антител (рис. 1). Наличие таких различий подтверждается данными о том, что при невынашивании беременности и АФС, в системном кровотоке имеются агрессивные факторы, такие как антифосфолипидные антитела [22], компоненты комплемента [19], окисленные липопротеиды низкой и очень низкой плотности [14], провоспалительные цитокины и другие субстанции способные вызывать повреждение эндотелиальных клеток.

Установлено, что сыворотки периферической крови, содержащие антифосфолипидные антитела, после инактивации комплемента оказывают меньший цитотоксический эффект в отношении эндотелиальных клеток линии EA.Hy926 по сравнению с сыворотками крови с неинактивированным комплементом (рис. 2). Таким образом, система комплемента, участвуя в повреждении эндотелия и развитии эндотелиальной дисфункции, является патогенетическим звеном в формировании тромбогенного эффекта при АФС [23].

В ходе экспериментов по оценке влияния ВВИГ на изменение чувствительности эндотелиальных клеток линии EA.Hy926 к цитотоксическому эффекту сыворотки крови беременных женщин установлено, что ВВИГ обладает цитопротективным эффектом в отношении эндотелиальных клеток. Отмечено снижение цитотоксического влияния сывороток крови на эндотелиальные клетки после их обработки ВВИГ, в отличие от эндотелиальных клеток, необработанных ВВИГ. При анализе данных, полученных в контрольной группе женщин с физиологической беременностью у всех пациенток (n=15) наблюдали снижение цитотоксического эффекта сыворотки крови после обработки клеток ВВИГ (4,7 {2,9;6,8}; полученные данные указаны в виде медианы {верхний квартиль; нижний квартиль}) по сравнению с цитотоксическим эффектом сывороток крови в отношении эндотелиальных клеток не обработанных ВВИГ (19,0 {51,8;12,2}, p<0,001). Для указанной группы женщин мы рассчитали цитопротективный эффект (ЦЭ), который показывает, насколько уменьшилась цитотоксичность сыворотки крови в отношении эндотелиальных клеток после обработки клеток ВВИГ по сравнению с интактными клетками, рассчитанный по формуле: ЦЭ(%) = 100 – 100Х / Х1, где Х – относительное количество (%) нежизнеспособных эндотелиальных клеток, обработанных иммуноглобулином, после культивирования с сывороткой периферической крови; Х1 – относительное количество (%) нежизнеспособных эндотелиальных клеток, не обработанных иммуноглобулином, после культивирования с сывороткой периферической крови.

Используя процентильное определение нормы, мы получили референсное значение для ЦЭ ВВИГ в отношении эндотелиальных клеток, равное 55%. При этом ЦЭ оценивался нами как положительный, если он был более 55%.

При анализе данных, полученных в группе женщин с привычным невынашиванием беременности без антифосфолипидных антител установлено, что у всех пациенток (n=15) цитотоксический эффект сыворотки периферической крови в отношении эндотелиальных клеток, не обработанных препаратом (46,6 {34,6;61,0}) снижался после обработки клеток препаратом ВВИГ (10,5 {5,1;17,6}, p<0,001). При этом в среднем ЦЭ составил 77,6±8,5.

При анализе данных, полученных в группе женщин с антифосфолипидными антителами показано, что цитотоксический эффект сыворотки периферической крови в отношении эндотелиальных клеток необработанных препаратом (46,8 {14,1;73,8}) снижался после обработки клеток препаратом ВВИГ (10,3 {4,1;60,0}, p<0,001). При этом в среднем ЦЭ составил 66,8±27,9. Следует отметить, что у трех пациенток снижение цитотоксического эффекта сыворотки крови после обработки клеток ВВИГ было менее чем на 55% (таблица). Скорее всего, у таких пациентов использование ВВИГ было бы малоэффективным и в клиническом плане.

Полученные данные позволяют предложить модель оценки ЦЭ ВВИГ в отношении клеток у беременных женщин с АФС. Предлагаемая модель позволит принимать решение о целесообразности использования препарата у конкретного пациента как при терапии женщин с привычным невынашиванием беременности и диагностированным АФС, так и при терапии других заболеваний, связанных с повреждением эндотелия и формированием эндотелиальной дисфункции.

Обсуждение результатов

Имеющиеся в настоящее время в литературе сведения по использованию ВВИГ в терапии женщин с привычным невынашиванием носят противоречивый характер. Имеются данные об эффективном и безопасном применении ВВИГ у женщин с привычным невынашиванием [24, 25]. С другой стороны, говорится о незначительном положительном эффекте иммунотерапии в отличие от плацебо, что отражено в Кокрановском систематическом обзоре, проведенном в 2014 году, включавшем 20 рандомизированных плацебо-контролируемых исследований, в которых оценивались различные методы иммунотерапии, такие как иммунизация лейкоцитами отца, донорскими лейкоцитами, мембранами трофобласта и ВВИГ у женщин с привычным невынашиванием беременности неясной этиологии [26].

Ранее нами показано, что проведенные курсы терапии ВВИГ у женщин с привычным невынашиванием способствуют нормализации показателей гемостаза. При оценке иммунного статуса пациентов, после терапии ВВИГ было отмечено повышение уровня Т-регуляторных лимфоцитов, играющих важную роль в индукции толерантности к аллоантигенам плода. Параллельно, у таких пациенток отмечали снижение уровня цитотоксических Т-лимфоцитов и В-лимфоцитов [27].

В настоящем исследовании мы оценили эффект ВВИГ как цитопротекторов в отношении эндотелиальных клеток. Эндотелий является источником целого ряда продуктов, участвующих в регуляции сосудистого тонуса, свертывающей системы, функции тромбоцитов, выполняет барьерную, секреторную, гемостатическую, вазотоническую функции, играет важную роль в процессах воспаления, ремоделирования сосудистой стенки, пролиферации, миграции клеток крови через сосудистую стенку [28].

Сохранение его функциональной активности необходимо для предотвращения развития патологических состояний связанных с повреждением эндотелия и развитием эндотелиальной дисфункции. В наших экспериментах продемонстрирована способность иммуноглобулинов оказывать протективный эффект. Так, после обработки эндотелиальных клеток ВВИГ происходило снижение цитотоксического эффекта сыворотки крови женщин с привычным невынашиванием беременности в отношении эндотелиальных клеток.

Данные эффекты обусловлены тем, что иммуноглобулины, входящие в состав ВВИГ способны адсорбироваться [29] на клеточной мембране за счет ковалентных взаимодействий [30], интернализоваться в клетку и вызывать модификации фенотипа эндотелиальных клеток с ингибированием их прокоагулянтной активности [31]. За счет своих достаточно крупных размеров и конфигурации, иммуноглобулины также способны «прикрывать» отрицательно заряженные фосфолипиды мембран клеток («зонтичное» прикрытие), препятствуя связыванию фосфолипидов с антифосфолипидными антителами и последующей активацией системы комплемента [32]. ВВИГ способны предупреждать комплемент-зависимое повреждение эндотелия за счет связывания С-3 и С-4 компонентов комплемента [31].

Заключение

Таким образом, проведенное нами исследование, оценивающее протективную роль иммуноглобулинов на модели in vitro, является основанием для дальнейшего их исследования в клинической практике и расширения спектра показаний к применению данного препарата.

Список литературы

1. Сидельникова В.М. Подготовка и ведение беременности у женщин с привычным невынашиванием. 3-е изд. М.: МЕДпресс-информ; 2013. 224с.

2. Насонов Е.Л. Антифосфолипидный синдром. М.: Литтерра; 2006. 440с.

3. Meroni P.L., Borghi M.O., Raschi E., Tedesco F. Pathogenesis of antiphospholipid syndrome: understanding the antibodies. Nat. Rev. Rheumatol. 2011; 7(6): 330-9.

4. Riboldi P., Gerosa M., Raschi E., Testoni C., Meroni P.L. Endothelium as a target for antiphospholipid antibodies. Immunobiology. 2003; 207(1): 29-36.

5. Cines D.B., Pollak E.S., Buck C.A., Loscalzo J., Zimmerman G.A., McEver R.P. et al.Endothelial cells in physiology and in the pathophysiology of vascular disorders. Blood. 1998; 91(10): 3527-61.

6. Rand J.H. Molecular pathogenesis of the antiphospholipid syndrome. Circ. Res. 2002; 90(1): 29-37.

7. Meroni P.L., Raschi E., Testoni C., Borghi M.O. Endothelial cell activation by antiphospholipid antibodies. Clin. Immunol. 2004; 112(2): 169-74.

8. Коноплева Л.Ф. Эндотелиальная дисфункция в патогенезе сердечно-сосудистых заболеваний и методы ее коррекции. Therapia. 2011; 3: 26-30.

9. Vlachoyiannopoulos P.G., Routsias J.G. A novel mechanism of thrombosis in antiphospholipid antibody syndrome. J. Autoimmun. 2010; 35(3): 248-55.

10. Bertsias G., Ioannidis J.P.A., Boletis J., Bombardieri S., Cervera R., Dostal C. et al. EULAR recommendations for the management of systemic lupus erythematosus. Report of a Task Force of the EULAR Standing Committee for International Clinical Studies Including Therapeutics. Ann. Rheum. Dis. 2008; 67(2): 195-205.

11. Danza A., Ruiz-Irastorza G., Khamashta M. Antiphospohlipid syndrome in obstetrics. Best Pract. Res. Clin. Obstet. Gynaecol. 2012; 26(1): 65-76.

12. Stephenson M.D., Kutteh W.H., Purkiss S., Librach C., Schultz P., Houlihan E., Liao C. Intravenous immunoglobulin and idiopathic secondary recurrent miscarriage: a multicentered randomized placebo-controlled trial. Hum. Reprod. 2010; 25(9): 2203-9.

13. Ensom M.H., Stephenson M.D. A two-center study on the pharmacokinetics of intravenous immunoglobulin before and during pregnancy in healthy women with poor obstetrical histories. Hum. Reprod. 2011; 26(9): 2283-8.

14. Ronda N., Bernini F., Giacosa R., Gatti R., Baldini N., Buzio C., Orlandini G. Normal human IgG prevents endothelial cell activation induced by TNF a and oxidized low-density lipoprotein atherogenic stimuli. Clin. Exp. Immunol. 2003; 133(2): 219-26.

15. Ушкалова Е.А., Шифман Е.М. Проблема нерегламенти­рованного применения иммуноглобулина для вну­­три­­венного введения в акушерстве. Акушерство и гинекология. 2011; 3: 74-80.

16. Christiansen O.B., Larsen E.C., Egerup P., Lunoee L., Egestad L., Nielsen H.S. Intravenous immunoglobulin treatment for secondary recurrent miscarriage: a randomised, double-blind, placebo-controlled trial. BJOG. 2015; 122(4): 500-8.

17. Hutton B., Sharma R., Fergusson D., Tinmouth A., Hebert P., Jamieson J., Walker M. Use of intravenous immunoglobulin for treatment of recurrent miscarriage: a systematic review. BJOG. 2007; 114(2): 134-42.

18. Erkan D., Aguiar C.L., Andrade D., Cohen H., Cuadrado M.J, Danowski A. et al. 14th International Congress on Antiphospholipid Antibodies: task force report on antiphospholipid syndrome treatment trends. Autoimmun. Rev. 2014; 13(6): 685-96.

19. Meroni P.L., Tedesco F., Locati M., Vecchi A., Di Simone N., Acaia B. et al.Anti-phospholipid antibody mediated fetal loss: still an open question from a pathogenic point of view. Lupus. 2010; 19(4): 453-6.

20. Pan L.F., Kreisle R.A., Shi Y.D. Detection of Fc gamma receptors on human endothelial cells stimulated with cytokines tumour necrosis factor-alpha ( TNF- alpha) and interferon-gamma ( IFN- gamma). Clin. Exp. Immunol. 1998; 112(3): 533-8.

21. Devaraj S., Davis B., Simon S.I., Jialal I. CRP promotes monocyte-endothelial cell adhesion via Fcgamma receptors in human aortic endothelial cells under static and shear flow conditions. Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 2006; 291(3): H1170-6.

22. D'Ippolito S., Di Simone N., Di Nicuolo F., Castellani R., Caruso A. Antiphospholipid antibodies: effects on trophoblast and endothelial cells. Am. J. Reprod. Immunol. 2007; 58(2): 150-8.

23. Rand J.H., Wolgast L.R. Dos and don'ts in diagnosing antiphospholipid syndrome. Hematology Am. Soc. Hematol. Educ. Program. 2012; 2012: 455-9.

24. Moraru M., Carbone J., Alecsandru D., Castillo-Rama M., García-Segovia A., Gil J. et al. Intravenous immunoglobulin treatment increased live birth rate in a Spanish cohort of women with recurrent reproductive failure and expanded CD56(+) cells. Am. J. Reprod. Immunol. 2012; 68(1): 75-84.

25. Christiansen O.B., Pedersen B., Rosgaard A., Husth M. A randomized, double-blind, placebo-controlled trial of intravenous immunoglobulin in the prevention of recurrent miscarriage: evidence for a therapeutic effect in women with secondary recurrent miscarriage. Hum. Reprod. 2002; 17(3): 809-16.

26. Wong L.F., Porter T.F., Scott J.R. Immunotherapy for recurrent miscarriage ( Review ). Cochrane Database Syst. Rev. 2014; (10: CD000112.

27. Чугунова А.А., Зайнулина М.С., Селютин А.В., Соколов Д.И., Михайлова В.А., Чепанов С.В., Сельков С.А. Содержание основных субпопуляций иммуно компетент­ных клеток у беременных с невынашиванием и антифосфолипидным синдромом при лечении препаратами иммуноглобулинов. Акушерство и гинекология. 2012; 2: 30-5.

28. Michiels C. Endothelial cell functions. J. Cell. Physiol. 2003; 196(3): 430-43.

29. Lima M.V.S., Duek E.A.R., Santana C.C. Adsorption of human immunoglobulin G to poly ( β-hydroxybutyrate) (PHB), poly (L- lactic Acid) (PLLA) and PHB/PLLA blends. Braz. J. Chem. Eng. 2009; 26(2): 257-64.

30. Gill V., Doig C., Knight D., Love E., Kubes P. Targeting adhesion molecules as a potential mechanism of action for intravenous immunoglobulin. Circulation. 2005; 112(13): 2031-9.

31. Arumugam T.V., Tang S.C., Lathia J.D.,Cheng A., Mughal M.R., Chigurupati S. Intravenous immunoglobulin (IVIG) protects the brain against experimental stroke by preventing complement-mediated neuronal cell death. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2007; 104(35): 14104-9.

32. Ronda N., Gatti R., Orlandini G., Borghetti A. Binding and internalization of human IgG by living cultured endothelial cells. Clin. Exp. Immunol. 1997; 109(1): 211-6.

Поступила 29.10.2015

Принята в печать 27.11.2015

Об авторах / Для корреспонденции

Чепанов Сергей Владимирович, врач клинической лабораторной диагностики лаборатории иммунологии ФГБНУ НИИ акушерства, гинекологии и репродуктологии им. Д.О. Отта. Адрес: 199034, Россия, Санкт-Петербург, Менделеевская линия, д. 3. Телефон: 8 (812) 328-98-50. E-mail: chepanovsv@gmail.com
Соколов Дмитрий Игоревич, д.б.н., в.н.с. лаборатории иммунологии ФГБНУ НИИ акушерства, гинекологии и репродуктологии им. Д.О. Отта. Адрес: 199034, Россия, Санкт-Петербург, Менделеевская линия, д. 3. Телефон: 8 (812) 323-75-45, 8 (812) 328-98-50, 8 (911) 243-69-50. E-mail: falcojugger@yandex.ru
Шляхтенко Татьяна Николаевна, к.м.н. с.н.с. лаборатории иммунологии ФГБНУ НИИ акушерства, гинекологии и репродуктологии им. Д.О. Отта. Адрес: 199034, Россия, Санкт-Петербург, Менделеевская линия, д. 3. Телефон: 8 (812) 328-98-50. E-mail: tatnicshl@mail.ru
Капустин Роман Викторович, к.м.н., врач акушер-гинеколог, акушерское отделение патологии беременности I, ФГБНУ НИИ акушерства, гинекологии и репродуктологии им. Д.О. Отта. Адрес: 199034, Россия, Санкт-Петербург, Менделеевская линия, д. 3. Телефон: 8 (812) 328-98-31. E-mail: kapustin.Roman@gmail.com
Окорокова Лариса Сергеевна, лаборант-исследователь лаборатории иммунологии ФГБНУ НИИ акушерства, гинекологии и репродуктологии им. Д.О. Отта. Адрес: 199034, Россия, Санкт-Петербург, Менделеевская линия, д. 3. Телефон: 8 (812) 328-98-50. E-mail: larisaok123@gmail.com
Белякова Ксения Львовна, лаборант-исследователь лаборатории иммунологии ФГБНУ НИИ акушерства, гинекологии и репродуктологии им. Д.О. Отта. Адрес: 199034, Россия, Санкт-Петербург, Менделеевская линия, д. 3. Телефон: 8 (812) 328-98-50. E-mail: kseniyabelyakova129@gmail.com
Сельков Сергей Алексеевич, д.м.н., проф., директор лаборатории иммунологии ФГБНУ НИИ акушерства, гинекологии и репродуктологии им. Д.О. Отта. Адрес: 199034, Россия, Санкт-Петербург, Менделеевская линия, д. 3. Телефон: 8 (812) 328-98-50. E-mail: selkovsa@mail.ru

Для цитирования: Чепанов С.В., Соколов Д.И., Шляхтенко Т.Н., Капустин Р.В., Окорокова Л.С., Белякова К.Л., Сельков С.А. Экспериментальное обоснование эндотелиопротективного эффекта иммуноглобулинов для внутривенного введения при акушерской патологии. Акушерство и гинекология. 2016; 5: 82-88.
http://dx.doi.org/10.18565/aig.2016.5.82-88

Также по теме

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, которые обеспечивают правильную работу сайта.