Цервикальные интраэпителиальные неоплазии: анализ профиля мРНК в практике жидкостной цитологии
Цель исследования. Оценить возможность проведения дифференцировки пациенток с цервикальной интраэпителиальной неоплазией (CIN) 2+ и CIN1 или менее на основе экспрессии 21-генной панели мРНК методом количественной полимеразной цепной реакции (ПЦР) в материале консервирующей жидкости флакона с образцами Пап-теста CellPrep.Мельникова Н.В., Боженко В.К., Антонова И.Б., Бабаева Н.А., Яровая Н.Ю., Болотина Н.А., Захаренко М.В., Сенчукова А.Л., Акопова Н.Б., Александрова Н.В., Бурменская О.В., Ашрафян Л.А.
Материал и методы. Уровень экспрессии мРНК 21 гена (Ki-67, STK-15, CCNB1, CCND1, MYC, MYBL2, P16INK4A, PTEN, BIRC5, BCL2, BAG1, TERT, NDRG1, ESR1, PGR, HER2, GRB7, MGB1, MMP11, CTSL2, CD68) определяли методом количественной ПЦР в материале консервирующей жидкости флакона после Пап-теста CellPrep у 59 пациенток, проходивших лечение в РНЦРР в 2015-2016 гг. Критерием достоверности были результаты сопоставления с последующим гистологическим исследованием.
Результаты исследования. Установлено, что сочетанная оценка уровней экспрессии мРНК генов ESR1 и MYBL2 позволяет, по данным дискриминантного анализа, провести правильную классификацию для пациенток с изменениями CIN2+ в 88,24% случаев, а для пациенток с гистологически подтвержденной CIN1 или менее – в 84,0% случаев. Сочетанная оценка уровней экспрессии мРНК 17 генов (ESR1, MYBL2, CD68, PTEN, CCND1, BCL2, HER2, MMP11, TERT, STK15, P16INK4A, BAG1, CTSL2, KI67, CCNB1, GRB7, NDRG1) позволяет с точностью 98,3% случаев дифференцировать группы CIN 2+ и CIN1 или менее. Совпадение классификации с данными гистологического исследования для группы CIN2+ составило 100,0% случаев, а для группы с гистологически подтвержденной CIN1 или менее – 96,0% случаев.
Заключение. Впервые показана возможность анализа экспрессии мРНК большой группы генов методом количественной ПЦР в материале жидкостной цитологии Пап-теста CellPrep. Оценка экспрессии панели 21 генов, дополняющая морфологическую дооперационную диагностику предраковых процессов и рака шейки матки по материалу жидкостной цитологии, позволяет с высокой точностью проводить дифференциальную диагностику 2 клинически важных групп: CIN 2+ и CIN1 или менее (неизмененный эпителий/доброкачественные изменения ткани шейки матки).
Ключевые слова
патология шейки матки
экспрессия генов
мРНК
жидкостная цитология
цитология
Список литературы
1. Каприн А.Д., Старинский В.В., Петрова Г.В., ред. Злокачественные новообразования в России в 2015 году (заболеваемость и смертность). М.: МНИОИ им. П.А. Герцена – филиал ФГБУ «НМИРЦ» Минздрава России; 2017. 250с. Available at: http://www.oncology.ru/service/statistics/malignant_tumors/2015.pdf
2. Боженко В.К., Кудинова Е.А., Близнюков О.П., Мельникова Н.В., Бурменская О.В. Патент на изобретение RUS 2464570, МПК G01N33/53. Метод диагностики цервикальных интраэпителиальных неоплазий. Заявитель и патентообладатель ФГУ „РНЦРР” Минздравсоцразвития России (RU). № 2010147074/15; Заявлено 19.11.2010; Опубл. 20.10.2012; Бюл. №29. 9с.
3. Боженко В.К., Ашрафян Л.А., Антонова И.Б., Мельникова Н.В., Бурменская О.Н., Трофимов Д.Ю., Кудинова Е.А., Хунова Л.З., Слонов А.В., Близнюков О.П. Анализ экспрессии генов пролиферации и апоптоза при цервикальных интраэпителиальных неоплазиях и раке шейки матки. Опухоли женской репродуктивной системы. 2011; 4: 72-5.
4. Del Pino M., Svanholm-Barrie C., Torné A., Marimon L., Gaber J., Sagasta A. et al. mRNA biomarker detection in liquid-based cytology: a new approach in the prevention of cervical cancer. Mod. Pathol. 2015; 28(2): 312-20. doi: 10.1038/modpathol.2014.106.
5. Wang H.Y., Park S., Kim S., Lee D., Kim G., Kim Y. et al. Use of hTERT and HPV E6/E7 mRNA RT-qPCR TaqMan assays in combination for diagnosing high-grade cervical lesions and malignant tumors. Am. J. Clin. Pathol. 2015; 143(3): 344-51. doi: 10.1309/AJCPF2XGZ2XIQYQX.
6. Боженко В.К., Васкевич Е.Ф., Трофимов Д.Ю., Бурменская О.В., Кудинова Е.А., Хунова Л.З. Анализ изменения профиля экспрессии генов при гиперпролиферативных заболеваниях шейки матки. Клиническая лабораторная диагностика. 2011; 9: 21.
7. Tavassoli F.A., Devilee P., eds. Pathology and genetics of tumours of the breast and female genital organs. Lyon: IARC; 2003. 432p.
8. Zhai Y., Bommer G.T., Feng Y., Wiese A.B., Fearon E.R., Cho K.R. Loss of estrogen receptor 1 enhances cervical cancer invasion. Am. J. Pathol. 2010; 177(2): 884-95. doi: 10.2353/ajpath.2010.091166.
9. Astbury K., McEvoy L., Brian H., Spillane C., Sheils O., Martin C. et al. MYBL2 (B-MYB) in cervical cancer: putative biomarker. Int. J. Gynecol. Cancer. 2011;21(2): 206-12. doi: 10.1097/IGC.0b013e318205759f.
Поступила 03.02.2017
Принята в печать 17.02.2017
Об авторах / Для корреспонденции
Mельникова Надежда Васильевна, к.м.н., в.н.с. лаборатории иммунологии, онкоцитологии и клеточной терапии в онкологии ФГБУ РНЦРР Минздрава России.Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Профсоюзная, д. 86. Телефон: 8 (495) 333-91-30. E-mail: n_melnikova@list.ru
Боженко Владимир Константинович, д.м.н., профессор, зав. отделом молекулярной биологии и экспериментальной терапии опухолей ФГБУ РНЦРР Минздрава России. Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Профсоюзная, д. 86. Телефон: 8 (499) 120-11-14. E-mail: vbojenko@mail.ru
Антонова Ирина Борисовна, д.м.н., зав. лабораторией профилактики, ранней диагностики и комбинированного лечения онкологических заболеваний ФГБУ РНЦРР Минздрава России. Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Профсоюзная, д. 86. Телефон: 8 (499) 120-60-77. E-mail: iran24@yandex.ru
Бабаева Наталия Александровна, д.м.н., в.н.с лаборатории профилактики, ранней диагностики и комбинированного лечения онкологических заболеваний ФГБУ РНЦРР Минздрава России. Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Профсоюзная, д. 86. Телефон: 8 (499) 120-60-77. E-mail: natbabaeva@yandex.ru
Яровая Наталия Юрьевна, к.м.н., зав. лабораторией цитологии патологоанатомического отделения ФГБУ РНЦРР Минздрава России.
Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Профсоюзная, д. 86. Телефон: 8 (499) 120-11-14. E-mail: natalya-yarovaya@yandex.ru
Болотина Наталия Александровна, к.м.н., врач-патологоанатом патологоанатомического отделения ФГБУ РНЦРР Минздрава России.
Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Профсоюзная, д. 86. Телефон: 8 (495) 333-91-30. E-mail: soloma-natali@yandex.ru
Захаренко Маргарита Владимировна, м.н.с. лаборатории иммунологии, онкоцитологии и клеточной терапии в онкологии ФГБУ РНЦРР Минздрава России.
Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Профсоюзная, д. 86. Телефон: 8 (499) 120-11-14. E-mail: zak-margarita@mail.ru
Сенчукова Анна Леонидовна, к.б.н., научный сотрудник лаборатории иммунологии, онкоцитологии и клеточной терапии в онкологии ФГБУ РНЦРР Минздрава России. Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Профсоюзная, д. 86. Телефон: 8 (499) 120-11-14. E-mail: asenchukova@gmail.com
Акопова Наталия Борисовна, к.м.н., врач акушер-гинеколог отдела лучевой и инструментальной диагностики онкологических заболеваний женских репродуктивных органов ФГБУ РНЦРР Минздрава России. Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Профсоюзная, д. 86. Телефон: 8 (499) 120-60-77
Александрова Наталия Владимировна, д.м.н., с.н.с. ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова.
Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. E-mail: alexandrova.ncagip@gmail.com
Бурменская Ольга Владимировна, д.б.н., старший научный сотрудник лаборатории молекулярно-генетических методов ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова. Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (916) 753-17-09. E-mail: bourmenska@mail.ru
Ашрафян Левон Андреевич, д.м.н., проф., заведующий научно-исследовательским отделом раннего канцерогенеза, профилактики, диагностики и комплексного лечения онкологических заболеваний женских репродуктивных органов ФГБУ РНЦРР Минздрава России.
Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Профсоюзная, д. 86. Телефон: 8 (495) 334-99-09
Для цитирования: Мельникова Н.В., Боженко В.К., Антонова И.Б., Бабаева Н.А., Яровая Н.Ю., Болотина Н.А., Захаренко М.В., Сенчукова А.Л., Акопова Н.Б., Александрова Н.В., Бурменская О.В., Ашрафян Л.А. Цервикальные интраэпителиальные неоплазии: анализ профиля мРНК в практике жидкостной цитологии. Акушерство и гинекология. 2017; 4: 95-100.
http://dx.doi.org/10.18565/aig.2017.4.95-100
Также по теме
